第1章 绪论 1
1.1 基因工程的基本概念 2
1.2 基因工程的发展历史 4
1.3 基因工程的应用 6
1.4 基因工程的安全性 10
1.5 我国的基因工程安全管理办法 12
第2章 基因工程的工具酶 16
2.1 限制性核酸内切酶 16
2.2 DNA连接酶 25
2.3 DNA聚合酶和逆转录酶 33
2.4 修饰酶类 38
2.5 其他工具酶 41
第3章 基因工程的克隆载体 45
3.1 基因工程载体的功能 45
3.2 质粒载体 46
3.3 噬菌体载体 63
3.4 柯斯质粒载体 74
3.5 噬菌粒载体 75
3.6 病毒载体 77
3.7 人工染色体克隆载体 84
第4章 基因工程的基本技术 92
4.1 核酸的提取、鉴定与保存 92
4.2 凝胶电泳技术 98
4.3 分子杂交技术 104
4.4 PCR 107
4.5 DNA序列分析 117
4.6 基因芯片及数据分析 120
4.7 研究蛋白质与DNA相互作用的主要方法 124
第5章 目的基因的获取 134
5.1 基因的人工化学合成 134
5.2 PCR扩增目的基因 138
5.3 从基因组文库获取目的基因 139
5.4 从cDNA文库获得目的基因 142
5.5 其他基因分离技术 151
第6章 目的基因的导入与重组体的鉴定 164
6.1 重组DNA导入原核细胞 164
6.2 重组DNA导入真核细胞 172
6.3 重组体克隆的筛选与鉴定 180
第7章 外源基因的原核表达系统 198
7.1 原核表达系统的特点 198
7.2 原核细胞表达系统 207
7.3 提高外源基因表达水平的措施 228
7.4 利用原核细胞生产蛋白质实例 236
第8章 外源基因的真核表达系统 242
8.1 真核表达系统的特点 242
8.2 酵母表达系统 243
8.3 昆虫或昆虫细胞表达系统 253
8.4 哺乳动物表达系统 261
第9章 转基因植物 271
9.1 转基因植物概述 271
9.2 植物基因转化受体系统 273
9.3 植物基因遗传转化方法 275
9.4 转基因植物的筛选与鉴定 297
9.5 提高外源基因在转基因植物中表达效率的途径 308
9.6 转基因植物的应用和展望 311
9.7 转基因植物的安全性评价 317
第10章 转基因动物 324
10.1 转基因动物发展简史 324
10.2 转基因动物技术 326
10.3 转基因动物的制备和检测 332
10.4 转基因动物研究中出现的问题及其对策 334
10.5 转基因动物技术的应用 335
10.6 转基因动物的安全性及其未来 339
第11章 基因工程技术在基因功能研究中的应用 342
11.1 基因敲除技术 342
11.2 基因过表达技术 346
11.3 基因敲减技术 348
11.4 基因编辑技术 350
第12章 基因治疗 360
12.1 分子病与基因治疗的基本概念 360
12.2 基因治疗的发展简史与现状 361
12.3 基因治疗的策略 364
12.4 基因治疗的基本程序 366
12.5 基因治疗的应用 371
12.6 基因治疗的前景 376
第13章 蛋白质工程 381
13.1 蛋白质工程的理论基础、诞生和发展 382
13.2 蛋白质工程的关键技术 394
13.3 蛋白质工程的设计思想 404