职业教育规划教材 基因工程操作基础PDF电子书下载

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项目1大肠杆菌的培养与分离 1

任务1培养基的制备 3

任务2大肠杆菌的接种 3

任务3大肠杆菌的培养 4

项目2核酸的分离与纯化 21

子项目1大肠杆菌质粒DNA的提取及定性、定量检测 21

任务1试剂的配制 24

任务2质粒的抽提 24

任务3质粒的定性检测 26

任务4质粒的定量和纯度检测 26

子项目2植物基因组DNA和总RNA的提取 27

任务1试剂的配制 30

任务2植物基因组DNA的提取 31

任务3植物总RNA的提取 32

任务4DNA（RNA）的定性、定量检测 33

子项目3动物基因组DNA和总RNA的提取 35

子项目3-1动物基因组DNA的提取 35

任务1标本的采集与保存 37

任务2试剂的配制 37

任务3DNA的提取 38

任务4DNA的纯度和浓度检测 39

子项目3-2动物总RNA的提取 40

任务1标本的采集与保存 41

任务2试剂的配制 42

任务3总RNA的提取 42

任务4RNA的纯度和浓度检测 43

子项目4酿酒酵母DNA及总RNA的提取 44

任务1试剂的配制 46

任务2酵母菌染色体DNA的提取（珠磨法） 47

任务3酵母菌总RNA的提取（热酚法） 47

任务4DNA（RNA）的浓度和纯度检测 48

项目3利用聚合酶链式反应（PCR）获取基因 123

子项目1目的基因的体外扩增 123

任务1引物的设计和合成 126

任务2PCR扩增目的基因 127

任务3琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物 127

任务4目的PCR产物的回收 127

子项目2引物拼接PCR技术合成目的基因 129

任务1目的基因的合成 132

任务2PCR产物的检测和回收 133

项目4目的基因的克隆、转化与表达 142

任务1目的基因Mlu I与克隆载体pUC 19的连接 145

任务2TOP10感受态的制备 145

任务3连接产物pUC19-Mlu I的转化和筛选（化学转化法） 146

任务4重组质粒pUC19-Mlu I和表达载体pET30a的酶切 147

任务5酶切后载体pET30a和目的基因Mlu I的连接 147

任务6连接产物pET30a-Mlu I的转化 148

任务7转化菌株的培养和筛选 148

任务8目的基因的蛋白表达 149

项目5DNA序列的定点突变 172

任务1突变基因的合成 173

任务2重组质粒的构建 174

任务3重组质粒的转化和检测 175

项目6cDNA文库的构建 184

子项目1cDNA文库的构建 185

任务1mRNA的制备 187

任务2cDNA第一链的合成 188

任务3cDNA第二链的合成 188

任务4cDNA加接头 189

任务5cDNA与载体连接 190

任务6重组cDNA导入宿主菌 195

任务7cDNA文库的扩增与鉴定 197

子项目2NGS文库的构建 198

附录 主要实验仪器的使用 221

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